在醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)中，體內(nèi)多類激素水平及其微量代謝產(chǎn)物、藥物及代謝產(chǎn)物、維生素類及疾病相關(guān)抗原的分析測(cè)定總計(jì)可達(dá)幾十至上百種之多。但由于其檢測(cè)靈敏度要求較高，一般免疫技術(shù)難以達(dá)到。因此，長(zhǎng)期以來一直使用放射免疫法。這不僅對(duì)操作人員的健康造成了危害，其廢棄物對(duì)環(huán)境也有嚴(yán)重的污染。因此需要特殊的防護(hù)及廢物處理系統(tǒng)；同時(shí)，由于受到自然衰變的限制，其試劑不便長(zhǎng)期儲(chǔ)存和運(yùn)輸，因而大大地限制了它的發(fā)展。

長(zhǎng)期以來，人們大多采用光度計(jì)作為主要檢測(cè)儀器，其原理是通過光電轉(zhuǎn)換器件將光信號(hào)轉(zhuǎn)換為電信號(hào)，再加以放大。其主要特點(diǎn)是結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單、性能穩(wěn)定；但靈敏度低、線性范圍窄。隨著現(xiàn)代量子物理學(xué)的發(fā)展以及人們對(duì)光的微觀特性認(rèn)識(shí)的逐步深入，出現(xiàn)了一種被稱為單光子計(jì)數(shù)器的新型光電器件。這種光子計(jì)數(shù)儀的靈敏度及線性范圍均已超過常規(guī)檢測(cè)技術(shù)能達(dá)到的水平。它能在檢測(cè)不到任何光線存在，即所謂“全黑環(huán)境”中正常工作，最主要的是該方法具有無(wú)輻射，無(wú)須對(duì)廢液后續(xù)處理的投入。

光電倍增管的結(jié)構(gòu)

光電倍增管是一種真空器件。它由光電發(fā)射陰極（光陰極）和聚焦電極、電子倍增極及電子收集極（陽(yáng)極）等組成。典型的光電倍增管按入射

光接收方式可分為端窗式和側(cè)窗式兩種類型。圖1所示為端窗型光電倍增管的剖面結(jié)構(gòu)圖。其主要工作過程如下：當(dāng)光照射到光陰極時(shí)，光陰極向真空中激發(fā)出光電子。這些光電子按聚焦極電場(chǎng)進(jìn)入倍增系統(tǒng)，并通過進(jìn)一步的二次發(fā)射得到的倍增放大。然后把放大后的電子用陽(yáng)極收集作為信號(hào)輸出。因?yàn)椴捎昧硕伟l(fā)射倍增系統(tǒng)，所以光電倍增管在探測(cè)紫外、可見和近紅外區(qū)的輻射能量的光電探測(cè)器中，具有極高的靈敏度和極低的噪聲。另外，光電倍增管還具有響應(yīng)快速、成本低、陰極面積大等優(yōu)點(diǎn)。

圖1  端窗型光電增管的剖面結(jié)構(gòu)圖

82c54的基本功能

intersil公司的定時(shí)/計(jì)數(shù)器82c54是8253的改進(jìn)型，操作方式及引腳與8253完全相同。它的改進(jìn)主要反映在82c54的計(jì)數(shù)頻率更高，可高達(dá)12mhz。片內(nèi)包含3個(gè)獨(dú)立的16位計(jì)數(shù)通道，每個(gè)計(jì)數(shù)通道有6種工作方式，可由程序設(shè)置和改變，所有的輸入／輸出電平信號(hào)都與ttl兼容。

光子計(jì)數(shù)儀的設(shè)計(jì)

1 總體方案設(shè)計(jì)

基于儀器整體安裝及可維護(hù)性的考慮，儀器采用整體形式，包括對(duì)儀器的控制、鍵盤操作及顯示、儀器的傳動(dòng)部分及光子檢測(cè)部分。采用96微孔板作為測(cè)量載體；為增強(qiáng)測(cè)量的定位準(zhǔn)確度和運(yùn)行的平穩(wěn)性，光電檢測(cè)系統(tǒng)以固定方式檢測(cè)樣品，送樣機(jī)構(gòu)可按要求進(jìn)行y方向及x方向順序運(yùn)動(dòng)。采用可視性強(qiáng)的液晶顯示器，可顯示儀器當(dāng)前所處狀態(tài)及每孔測(cè)量結(jié)果。定義20種可選擇的測(cè)量時(shí)間，可對(duì)微孔板的任意行數(shù)定義測(cè)量；數(shù)據(jù)輸出采用外接打印機(jī)，原始數(shù)據(jù)可在主機(jī)獨(dú)立測(cè)量完畢后由打印機(jī)輸出。計(jì)算機(jī)控制測(cè)量可完全替代單機(jī)測(cè)量的功能，同時(shí)可在windows的操作軟件包下進(jìn)行樣品區(qū)、標(biāo)準(zhǔn)區(qū)、陰陽(yáng)性孔位定義、測(cè)量及數(shù)據(jù)處理。

采用日產(chǎn)光電倍增管作為光子檢測(cè)裝置的核心部分。傳動(dòng)系統(tǒng)采用齒杠、齒輪傳動(dòng)與同步帶、齒輪傳動(dòng)相結(jié)合的形式，送樣器（孔板托盤）、光電檢測(cè)裝置在開機(jī)后及測(cè)量完畢均定位在初始位置；送樣器及光電檢測(cè)裝置的傳動(dòng)系統(tǒng)采取互相垂直的獨(dú)立運(yùn)動(dòng)機(jī)構(gòu)。計(jì)數(shù)儀采用mgl（s）24064帶背景光綠色顯示屏的顯示器，89c55單片機(jī)控制，82c54計(jì)數(shù)，外接中文打印機(jī)，和單片機(jī)通過rs232通信。具體硬件電路如圖2所示。

點(diǎn)擊看原圖

圖2  光子技術(shù)儀硬件電路

2 測(cè)量原理

該儀器的測(cè)量原理為單光子計(jì)數(shù)法。微弱光信號(hào)檢測(cè)一般以光電倍增管（pmt）為檢測(cè)器，在弱光下，光電倍增管的電流來源于光子碰撞光陰極產(chǎn)生的光電子發(fā)射，并經(jīng)倍增后在陽(yáng)極形成電脈沖輸出。

光子檢測(cè)裝置的核心是光電倍增管，其各電極之間均加有規(guī)定值較高的直流電壓。當(dāng)光子打到光陰極時(shí)，由于光電效應(yīng)的作用，其表面可以產(chǎn)生能量微弱的游離電子，稱為光電子；該電子在直流高壓產(chǎn)生的電場(chǎng)作用下離開光陰極，同時(shí)被加速，再次打到打拿極上并產(chǎn)生出能量更大數(shù)量更多的光電子，就這樣經(jīng)過多個(gè)打拿極的反復(fù)放大，最后使陽(yáng)極產(chǎn)生電脈沖信號(hào)，該信號(hào)經(jīng)前置放大器放大，在經(jīng)比較器去除噪聲信號(hào)，最后由分頻器換算出光子脈沖數(shù)，如圖3所示。

圖3  單光子計(jì)數(shù)法原理圖

3 軟件設(shè)計(jì)

本設(shè)計(jì)選擇82c54的模式0工作，計(jì)數(shù)器0、計(jì)數(shù)器1都工作于模式0，計(jì)數(shù)結(jié)束發(fā)出中斷信號(hào)。軟件流程如圖4所示。

圖4  軟件流程圖

當(dāng)程序進(jìn)入到非程序區(qū)，只要在非程序區(qū)設(shè)置攔截措施，使程序進(jìn)入陷阱，然后強(qiáng)迫程序回到初始狀態(tài)。如對(duì)cpu的rst指令對(duì)應(yīng)的字節(jié)碼為0ffh，如果不用的程序存儲(chǔ)區(qū)預(yù)先寫入0ffh，則當(dāng)程序因干擾而“飛”到該區(qū)域執(zhí)行代碼時(shí)，就相當(dāng)于執(zhí)行1條rst指令，從而達(dá)到系統(tǒng)復(fù)位的目的。

結(jié)論

采用光電倍增管和82c54設(shè)計(jì)的光子計(jì)數(shù)儀，整機(jī)無(wú)論從結(jié)構(gòu)到電器性能都達(dá)到了設(shè)計(jì)要求。通過一段時(shí)間的使用，從各用戶都得到了滿意的反饋。